本文主要讲的是关于基因工程的基本操作程序的文章。基因工程又称dna重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种dna分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。那下面为大家讲解一下关于基因工程的基本操作程序的步骤。在某种程度上，beadarray芯片的发展已超越了很多的同行业务，但其从未停止脚步一直砥砺前行着。
（1）基因工程目标的获取
①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多dna片段，导入受体菌的群体储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。
②基因文库的种类：1、基因组文库；2、部分基因文库。
利用pcr技术扩增目的基因
①pcr含义：是一项在生物体外复制特定dna片段的核糖合成技术。全称是多聚酶链式反应。
②pcr原理：dna双链复制。
③前提条件：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。
④扩增过程：目的基因dna受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，在dna聚合酶的作用下进行延伸，如此重复循环多次。
⑤结果：每次循环后的目的基因的量增加一倍，即成指数形式扩增。
（2）目的基因与运载体结合
基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的dna重新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，再加入适量dna连接酶，质粒的黏性末端与目的基因dna片段的黏性末端就会因碱基互补配对而结合，形成一个重组dna分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒dna分子结合，形成重组dna分子（也叫重组质粒）的。
（3）将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组dna分子后，下一步是将重组dna分子引入受体细胞中进行扩增。
基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌，枯草杆菌，土壤农杆菌，酵母菌和动植物细胞等。
用人工方法使体外重组的dna分子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如，如果运载体是质粒，受体细胞是细菌，一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌的繁殖速度非常快，在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。
（4）目的基因的检测和表达
目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。
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